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真空冷凍干機(jī)的分類
1 真空冷凍干燥機(jī)特點
　　1.冷凍真空干燥過程是無不純物混入物體，能保持物料的原有成份和活性成份及物料形體不受損。
　　2.利用真空冷凍干燥原理制造，結(jié)構(gòu)緊湊合理，維護(hù)便利、費(fèi)用低廉，全自動控制、操作簡便。
　　3.功能周全，無需配套設(shè)施（蒸汽鍋爐、冷卻塔等),通上三相電便可獨(dú)立工作。
　　4.設(shè)計獨(dú)特，能耗極低。使低價格物料的凍干有利可圖。
2 真空冷凍干燥機(jī)工作原理 
　　開機(jī)后將物料投入物料箱內(nèi)進(jìn)行冷凍.物料的冷凍過程.一方面是真空系統(tǒng)進(jìn)行抽真空把一部分水份帶走;另一方面是物料受凍時把某些分子中所含水份排到物料的表面凍結(jié).達(dá)到冷凍要求后,由加熱系統(tǒng)對物料加熱干燥,通過抽真空把物料中所含的水份帶到冷凍捕集箱結(jié)凍,達(dá)到物料冷凍干燥要求.[1]
　　冷凍干燥是指通過升華從凍結(jié)的生物產(chǎn)品中去除水分或其他溶劑的過程。升華指的是溶劑，比如水，象干冰一樣，不經(jīng)過液態(tài)，從固態(tài)直接變?yōu)闅鈶B(tài)的過程。冷凍干燥得到的產(chǎn)物稱作凍干物（lyophilizer），該過程稱作凍干（lyophilization）。
　　傳統(tǒng)的干燥會引起材料皺縮，破壞細(xì)胞。在冰凍干燥過程中樣品的結(jié)構(gòu)不會被破壞，因為固體成份被在其位置上的堅冰支持著。在冰升華時，它會留下孔隙在干燥的剩余物質(zhì)里。這樣就保留了產(chǎn)品的生物和化學(xué)結(jié)構(gòu)及其活性的完整性。
　　在實驗室中，凍干有很多不同的用途，它在許多生物化學(xué)與制藥應(yīng)用中是不可缺少的。它被用來獲得可長時期保存的生物材料，例如微生物培養(yǎng)、酶、血液、與藥品，除長期保存的穩(wěn)定性以外，還保留了其固有的生物活性與結(jié)構(gòu)。為此，凍干被用于準(zhǔn)備用做結(jié)構(gòu)研究（例如電鏡研究）的組織樣品。冷凍干燥也應(yīng)用于化學(xué)分析中，它能得到干燥態(tài)的樣品，或者濃縮樣品以增加分析敏感度。凍干使樣品成分穩(wěn)定，也不需改變化學(xué)組成，是理想的分析輔助手段。
　　冷凍干燥可以自然發(fā)生。在自然情況下，這一過程緩慢而且不可預(yù)測。通過冷凍干燥系統(tǒng)，人們改進(jìn)、細(xì)分了很多步驟，加速了這一過程。
3 基本內(nèi)容 
首先節(jié)
　　干燥是保持物質(zhì)不致腐敗變質(zhì)的方法之一.干燥的方法許多,如曬干、煮干、烘干、噴霧干燥和真空干燥等.但這些干燥方法都是在0℃以上或更高的溫度下進(jìn)行.干燥所得的產(chǎn)品,一般是體積縮小、質(zhì)地變硬,有些物質(zhì)發(fā)生了氧化,一些易揮發(fā)的成分大部分會損失掉,有些熱敏性的物質(zhì),如蛋白質(zhì)、維生素會發(fā)生變性.微生物會失去生物活力,干燥后的物質(zhì)不易在水中溶解等.因此干燥后的產(chǎn)品與干燥前相比在性狀上有很大的差別.
　　而冷凍干燥法不同于以上的干燥方法,產(chǎn)品的干燥基本上在0℃以下的溫度進(jìn)行,即在產(chǎn)品凍結(jié)的狀態(tài)下進(jìn)行,直到后期,為了進(jìn)一步降低產(chǎn)品的殘余水份含量,才讓產(chǎn)品升至0℃以上的溫度,但一般不超過40℃.
　　冷凍干燥就是把含有大量水分物質(zhì),預(yù)先進(jìn)行降溫凍結(jié)成固體,然后在真空的條件下使水蒸汽直接升華出來,而物質(zhì)本身剩留在凍結(jié)時的冰架中,因此它干燥后體積不變,疏松多孔在升華時要吸收熱量.引起產(chǎn)品本身溫度的下降而減慢升華速度,為了增加升華速度,縮短干燥時間,必須要對產(chǎn)品進(jìn)行適當(dāng)加熱.整個干燥是在較低的溫度下進(jìn)行的.
　　冷凍干燥有下列優(yōu)點:
　　一．冷凍干燥在低溫下進(jìn)行,因此對于許多熱敏性的物質(zhì)特別適用.如蛋白質(zhì)、微生物之類不會發(fā)生變性或失去生物活力.因此在醫(yī)藥上得到廣泛地應(yīng)用.
　　二．在低溫下干燥時,物質(zhì)中的一些揮發(fā)性成分損失很小,適合一些化學(xué)產(chǎn)品,藥品和食品干燥.
　　三．在冷凍干燥過程中,微生物的生長和酶的作用無法進(jìn)行,因此能保持原來的性裝.
　　四．由于在凍結(jié)的狀態(tài)下進(jìn)行干燥,因此體積幾乎不變,保持了原來的結(jié)構(gòu),不會發(fā)生濃縮現(xiàn)象.
　　五．干燥后的物質(zhì)疏松多孔,呈海綿狀,加水后溶解迅速而完全,幾乎立即恢復(fù)原來的性狀.
　　六．由于干燥在真空下進(jìn)行,氧氣極少,因此一些易氧化的物質(zhì)得到了保護(hù).
　　七．干燥能排除95-99%以上的水份,使干燥后產(chǎn)品能長期保存而不致變質(zhì).
　　因此,冷凍干燥目前在醫(yī)藥工業(yè),食品工業(yè),科研和其他部門得到廣泛的應(yīng)用.
第二節(jié)
凍干機(jī)的組成和凍干程序
　　產(chǎn)品的冷凍干燥需要在一定裝置中進(jìn)行,這個裝置叫做真空冷凍干燥機(jī),簡稱凍干機(jī).
　　凍干機(jī)按系統(tǒng)分,由致冷系統(tǒng)、真空系統(tǒng)、加熱系統(tǒng)、和控制系統(tǒng)四個主要部分組成.按結(jié)構(gòu)分,由凍干箱或稱干燥箱、冷凝器或稱水汽凝集器、冷凍機(jī)、真空泵和閥門、電氣控制元件等組成.圖十三是凍干機(jī)組成示意圖.
　　凍干箱是一個能夠致冷到-40℃左右,能夠加熱到+50℃左右的高低溫箱,也是一個能抽成真空的密閉容器.它是凍干機(jī)的主要部分,需要凍干的產(chǎn)品就放在箱內(nèi)分層的金屬板層上,對產(chǎn)品進(jìn)行冷凍,并在真空下加溫,使產(chǎn)品內(nèi)的水份升華而干燥.
　　冷凝器同樣是一個真空密閉容器,在它的內(nèi)部有一個較大表面積的金屬吸附面,吸附面的溫度能降到-40℃以下,并且能恒定地維持這個低溫.冷凝器的功用是把凍干箱內(nèi)產(chǎn)品升華出來的水蒸氣凍結(jié)吸附在其金屬表面上.
　　凍干箱、冷凝器、真空管道和閥門,再加上真空泵,便構(gòu)成凍干機(jī)的真空系統(tǒng).真空系統(tǒng)要求沒有漏氣現(xiàn)象,真空泵是真空系統(tǒng)建立真空的重要部件.真空系統(tǒng)對于產(chǎn)品的迅速升華干燥是必不可少的.
　　致冷系統(tǒng)由冷凍機(jī)與凍干箱、冷凝器內(nèi)部的管道等組成.冷凍機(jī)可以是互相獨(dú)立的二套,也可以合用一套.冷凍機(jī)的功用是對凍干箱和冷凝器進(jìn)行致冷,以產(chǎn)生和維持它們工作時所需要的低溫,它有直接致冷和間接致冷二種方式.
　　加熱系統(tǒng)對于不同的凍干機(jī)有不同的加熱方式.有的是利用直接電加熱法；有的則利用中間介質(zhì)來進(jìn)行加熱,由一臺泵使中間介質(zhì)不斷循環(huán).加熱系統(tǒng)的作用是對凍干箱內(nèi)的產(chǎn)品進(jìn)行加熱,以使產(chǎn)品內(nèi)的水份不斷升華,并達(dá)到規(guī)定的殘余水份要求.

　　控制系統(tǒng)由各種控制開關(guān),指示調(diào)節(jié)儀表及一些自動裝置等組成,它可以較為簡單,也可以很復(fù)雜.一般自動化程度較高的凍干機(jī)則控制系統(tǒng)較為復(fù)雜.控制系統(tǒng)的功用是對凍干機(jī)進(jìn)行手動或自動控制,操縱機(jī)器正常運(yùn)轉(zhuǎn),以凍干出合乎要求的產(chǎn)品來.
　　冷凍干燥的程序是這樣的:在凍干之前,把需要凍干的產(chǎn)品分裝在合適的容器內(nèi),一般是玻瓶或安瓶,裝量要均勻,蒸發(fā)表面盡量大而厚度盡量薄些；然后放入與凍干箱尺寸相適應(yīng)的金屬盤內(nèi).裝箱之前,先將凍干箱進(jìn)行空箱降溫,然后將產(chǎn)品放入凍干箱內(nèi)進(jìn)行預(yù)凍,抽真空之前要根據(jù)冷凝器冷凍機(jī)的降溫速度提前使冷凝器工作,抽真空時冷凝器應(yīng)達(dá)到-40℃左右的溫度,待真空度達(dá)到一定數(shù)值后(通常應(yīng)達(dá)到100uHg以上的真空度),即可對箱內(nèi)產(chǎn)品進(jìn)行加熱.一般加熱分兩步進(jìn)行,首先步加溫不使產(chǎn)品的溫度超過共熔點的溫度；待產(chǎn)品內(nèi)水份基本干完后進(jìn)行第二步加溫,這時可迅速地使產(chǎn)品上升的規(guī)定的很高溫度.在很高溫度保持?jǐn)?shù)小時后,即可結(jié)束凍干.
　　整個升華干燥的時間約12-24小時左右,與產(chǎn)品在每瓶內(nèi)的裝量,總裝量,玻璃容器的形狀、規(guī)格,產(chǎn)品的種類,凍干曲線及機(jī)器的性能等等有關(guān).
　　凍干結(jié)束后,要放干燥無菌的空氣進(jìn)入干燥箱,然后盡快地進(jìn)行加塞封口,以防重新吸收空氣中的水份.
　　在凍干過程中,把產(chǎn)品和板層的溫度、冷凝器溫度和真空度對照時間劃成曲線,叫做凍干曲線.一般以溫度為縱坐標(biāo),時間為橫坐標(biāo).凍干不同的產(chǎn)品采用不同的凍干曲線.同一產(chǎn)品使用不同的凍干曲線時,產(chǎn)品的質(zhì)量也不相同,凍干曲線還與凍干機(jī)的性能有關(guān).因此不同的產(chǎn)品,不同的凍干機(jī)應(yīng)用不同的凍干曲線.圖十四是凍干曲線示意圖(其中沒有冷凝器的溫度曲線和真空度曲線).
第三節(jié)
共溶點及其測量方法
　　需要凍干的產(chǎn)品,一般是預(yù)先配制成水的溶液或懸濁液,因此它的冰點與水就不相同了,水在0℃時結(jié)冰,而海水卻要在低于0℃的溫度才結(jié)冰,因為海水也是多種物質(zhì)的水溶液.實驗指出溶液的冰點將低于溶媒的冰點.
　　另外,溶液的結(jié)冰過程與純液體也不一樣,純液體如水在0℃時結(jié)冰,水的溫度并不下降,直到全部水結(jié)冰之后溫度才下降,這說明純液體有一個固定的結(jié)冰點.而溶液卻不一樣,它不是在某一固定溫度完全凝結(jié)成固體,而是在某一溫度時,晶體開始析出,隨著溫度的下降,晶體的數(shù)量不斷增加,直到很后,溶液才全部凝結(jié).這樣,溶液并不是在某一固定溫度時凝結(jié).而是在某一溫度范圍內(nèi)凝結(jié),當(dāng)冷卻時開始析出晶體的溫度稱為溶液的冰點.而溶液全部凝結(jié)的溫度叫做溶液的凝固點.因為凝固點就是融化的開始點(既熔點),對于溶液來說也就是溶質(zhì)和溶媒共同熔化的點.所以又叫做共熔點.可見溶液的冰點與共熔點是不相同的.共熔點才是溶液真正全部凝成固體的溫度.
　　顯然共熔點的概念對于冷凍干燥是重要的,因為凍干產(chǎn)品可能有鹽類、糖類、明膠、蛋白質(zhì)、血球、組織、病毒、細(xì)菌等等的物質(zhì).因此它是一個復(fù)雜的液體,它的凍結(jié)過程肯定也是一個復(fù)雜的過程,與溶液相似,也有一個真正全部凝結(jié)成固體的溫度.即共熔點.由于冷凍干燥是在真空狀態(tài)下進(jìn)行.只有產(chǎn)品全部凍結(jié)后才能在真空下進(jìn)行升華,否則有部分液體存在時,在真空下不僅會迅速蒸發(fā),造成液體的濃縮使凍干產(chǎn)品的體積縮小；而且溶解在水中的氣體在真空下會迅速冒出來,造成象液體沸騰的樣子,使凍干產(chǎn)品鼓泡,甚至冒出瓶外.這是我們所不希望的.為此凍干產(chǎn)品在升華開始時必須要冷到共熔點以下的溫度,使凍干產(chǎn)品真正全部凍結(jié).
　　在凍結(jié)過程中,從外表的觀察來確定產(chǎn)品是否完全凍結(jié)成固體是不可能的；靠測量溫度也無法確定產(chǎn)品內(nèi)部的結(jié)構(gòu)狀態(tài).而隨著產(chǎn)品結(jié)構(gòu)發(fā)生變化時電性能的變化是極為有用的,特別是在凍結(jié)是電阻率的測量能使我們知道凍結(jié)是在進(jìn)行還是已經(jīng)完成了,全部凍結(jié)后電阻率將非常大,因此溶液是離子導(dǎo)電.凍結(jié)是離子將固定不能運(yùn)動,因此電阻率明顯增大.而有少量液體存在時電阻率將顯著下降.因此測量產(chǎn)品的電阻率將能確定產(chǎn)品的共熔點.
　　正規(guī)的共熔點測量法是將一對白金電極浸入液體產(chǎn)品之中,并在產(chǎn)品中插一溫度計,把它們冷卻到-40℃以下的低溫,然后將凍結(jié)產(chǎn)品慢慢升溫.用惠斯頓電橋來測量其電阻,當(dāng)發(fā)生電阻突然降低時,這時的溫度即為產(chǎn)品的共熔點.電橋要用交流電供電,因為直流電會發(fā)生電解作用,整個過程由儀表記錄.(圖十六)
　　也可用簡單的方法來測量,如圖十五所示.用二根適當(dāng)粗細(xì)而又互相絕緣的銅絲插入盛放產(chǎn)品的容器中,作為電極.在銅電極附近插入一支溫度計,插入深度與電極差不多,把它們一起放入凍干箱內(nèi)的觀察窗孔附近,并用適當(dāng)方法把它們固定好,然后與其他產(chǎn)品一起預(yù)凍,這時我們用萬用表不斷地測量在降溫過程中的電阻數(shù)值,根據(jù)電阻數(shù)值的變化來確定共熔點.
　　把電極引線通過一個開關(guān)與萬用表相連,可以不分正負(fù)極.如果凍干箱沒有電線引出接頭,則可以用二根細(xì)導(dǎo)線從箱門縫處引出,在電線附近涂些真空密封蠟,這樣不致于影響真空度.
　　待溫度計降至0℃之后即開始測量并作記錄.把萬用表的轉(zhuǎn)換開關(guān)放在測量電阻的很(×1K或×10K).由于萬用表內(nèi)使用的是直流電,為了防止電解作用,在每次測量完之后要把開關(guān)立即關(guān)掉,把每一次測量的溫度和電阻數(shù)值一一記錄下來.開始時電阻值很小,以后逐步增高.到某一溫度時電阻突然增大,幾乎是無窮大,這時的溫度值便是共熔點數(shù)值.
　　用這種方法測量的共熔點有一定的誤差,因為銅電極處多少有些電解作用.萬用表對于高阻值沒有電橋靈敏；另外,凍結(jié)過程與熔化過程電阻的變化情況并不完全相同,但所測之值仍有實用參考價值.
　　共熔點的數(shù)值從0℃到40℃不等,與產(chǎn)品的品種、保護(hù)劑的種類和濃度有關(guān).一些物質(zhì)的共熔點列表二十二供參考,因?qū)嶋H的凍干產(chǎn)品還有其它成份.所以與此不相同.
第四節(jié)
產(chǎn)品的預(yù)凍
　　產(chǎn)品在進(jìn)行冷凍干燥時,需要裝入適宜的容器,然后進(jìn)行預(yù)先凍結(jié),才能進(jìn)行升華干燥.預(yù)凍過程不僅昰為了保護(hù)物質(zhì)的主要性能不變；而且要獲得凍結(jié)后產(chǎn)品有合理的結(jié)構(gòu)以利于水份的升華；還要有恰當(dāng)?shù)难b量,以便日后的應(yīng)用.
　　產(chǎn)品的分裝通常有散裝和瓶裝二種方式.散裝可以采用金屬盤,飯盒或玻璃器皿；瓶裝采用玻璃瓶和安瓿.玻璃瓶又有血漿瓶.疫苗瓶和青霉素小瓶等,安瓿也有平底安瓿、長安瓿和圓安瓿等；這些需根據(jù)產(chǎn)品的日后使用情況來決定,瓶子還需配上合適的膠塞.
　　各種容器在分裝之前要求清洗干凈并進(jìn)行滅菌處理.
　　需要凍干的產(chǎn)品需配制成一定濃度的液體,為了能保證干燥后有一定的形狀,物質(zhì)含量在10~15%之間很佳.
　　產(chǎn)品分裝到容器有一定的表面積與厚度之比.表面積要大一些,厚度要小些.表面積大有利于升華,產(chǎn)品厚度大不利于升華.一般分裝厚度不大于10mm.有些產(chǎn)品需用大瓶.并凍干較大量的產(chǎn)品時,可以采用旋凍的方法凍成殼狀,或傾斜容器凍成斜面,以增大表面積,減小厚度.
　　產(chǎn)品的預(yù)凍方法有凍干箱內(nèi)預(yù)凍法和箱外預(yù)凍法.
　　箱內(nèi)預(yù)凍法是直接把產(chǎn)品放置在凍干機(jī)凍干箱內(nèi)的多層擱板上,由凍干機(jī)的冷凍機(jī)來進(jìn)行冷凍.大量的小瓶和安瓿進(jìn)行凍干時為了進(jìn)箱和出箱方便,一般把小瓶或安瓿分裝在若干金屬盤內(nèi),再裝進(jìn)箱子.為了改進(jìn)熱傳遞,有些金屬盤制成可分離式,進(jìn)箱時把底抽走,讓小瓶直接與凍干箱的金屬板接觸；對于不可抽低的盤子要求盤底平整,以獲得產(chǎn)品的均一性.采用旋凍法的大血漿瓶要事先凍好后加上導(dǎo)熱用的金屬架或塊后再進(jìn)行冷凍.
　　箱外預(yù)凍有二種方法.有些小型凍干機(jī)沒有進(jìn)行預(yù)凍產(chǎn)品的裝置.只能利用低溫冰箱或酒精加干冰來進(jìn)行預(yù)凍.另一種是專用的旋凍器,它可把大瓶的產(chǎn)品邊旋轉(zhuǎn)邊冷凍成殼狀結(jié)構(gòu).然后再進(jìn)入凍干箱內(nèi)
　　還有一種特殊的離心式預(yù)凍法,離心式凍干機(jī)就采用此法.利用在真空下液體迅速蒸發(fā),吸收本身的熱量而凍結(jié).旋轉(zhuǎn)的離心力防止產(chǎn)品中的氣體溢出,使產(chǎn)品能“平靜地”凍結(jié)成一定的形狀.
　　轉(zhuǎn)速一般為800轉(zhuǎn)/分左右.
　　冷凍對細(xì)胞和生命體產(chǎn)生一定的破壞作用,其機(jī)理是非常復(fù)雜的.目前尚無統(tǒng)一的理論,
　　但一般認(rèn)為主要是由機(jī)械效應(yīng)和溶質(zhì)效應(yīng)引起.
　　生物物質(zhì)的冷凍過程首先是從純水結(jié)冰開始,冰晶的生長逐步造成電解質(zhì)的濃縮.隨后是低共熔混合物凝固.很后全部變?yōu)楣腆w.
　　機(jī)械效應(yīng)是細(xì)胞內(nèi)外冰晶生長而產(chǎn)生的機(jī)械力量引起的.特別是對于有細(xì)胞膜的生命體影像較大.一般冰晶越大,細(xì)胞膜越易破裂,從而造成細(xì)胞死亡；冰晶小,對細(xì)胞膜的機(jī)械損傷也較小.
　　緩慢冷凍產(chǎn)生的冰晶較大,快速冷凍產(chǎn)生的冰晶較??；就此而言.快速冷凍對細(xì)胞的影響較小.緩慢冷凍容易引起細(xì)胞的死亡.
　　溶質(zhì)效應(yīng)是由于水的凍結(jié)使間隙液體逐漸濃縮,從而使電解質(zhì)的濃度增加,蛋白質(zhì)對電解質(zhì)是較敏感的.電解質(zhì)濃度的增加引起蛋白質(zhì)的變性,而使細(xì)胞死亡；另外電解質(zhì)濃度的增加會使細(xì)胞脫水而死亡.間隙液體濃度越高.上述原因引起的破壞也越厲害.溶質(zhì)效應(yīng)在某一溫度范圍很為明顯.這個溫度范圍在水的冰點和該液體的全部固化溫度之間.若能以較高的速度越過這一溫度范圍,溶質(zhì)效應(yīng)所產(chǎn)生的效果就能大大減弱.
　　另外冷凍時所形成的晶體大小在很大程度上也影響干燥的速率和干燥后產(chǎn)品的溶解速度.大的冰晶容易升華,小的冰晶不利于升華；但大的冰晶溶解慢,小的冰晶溶解快.冰晶越小、干燥后越能反映產(chǎn)品的原來結(jié)構(gòu).
　　綜上所述,需要有一個很優(yōu)的冷卻速率.以得到很高的細(xì)胞存活率,很好的產(chǎn)品物理性狀和溶解速度.當(dāng)然提高存活率與在產(chǎn)品中加入抗低溫劑(保護(hù)劑之一)還有很大的關(guān)系.列如甘油、二甲亞砜、糖類等.這些抗低溫物質(zhì)能幫助產(chǎn)品擴(kuò)大很優(yōu)冷卻速率的范圍,以便使更多的細(xì)胞存活下來.
　　為了獲的不同的降溫速度.就要采取不同的預(yù)凍方法；列如有時需裝箱之后才開始凍干箱的降溫,有時需讓機(jī)器預(yù)先降到低溫,再將產(chǎn)品裝入凍干箱內(nèi).
　　預(yù)凍的目的也是為了固定產(chǎn)品,以便在真空下進(jìn)行升華.如果沒有凍實.則抽真空時產(chǎn)品會冒出瓶外來,沒有一定的形狀；如果冷的過低,則不僅浪費(fèi)了能源和時間,而且對某些產(chǎn)品還會降低存活率.
　　因此預(yù)凍之前應(yīng)確定三個數(shù)據(jù).其一是預(yù)凍的速率,應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品不同而試驗出一個很優(yōu)冷凍速率.其二是預(yù)凍的很低溫度,應(yīng)根據(jù)改產(chǎn)品的共熔點來決定,預(yù)凍的很低溫度應(yīng)低于共熔點的溫度.其三是預(yù)凍的時間,根據(jù)機(jī)器的情況來決定,保證抽真空之前所有產(chǎn)品均已凍實.不致因抽真空而冒出瓶外,凍干箱的每一板層之間,每一板層的各部分之間溫差越小,則預(yù)凍的時間可以相應(yīng)縮短,一般產(chǎn)品的溫度達(dá)到預(yù)凍很低溫度之后1－2小時即可開始抽真空升華.